Manipulation von kultivierten Zellen

Zu den üblichen Manipulationen, die an Kulturzellen durchgeführt werden, gehören Medienwechsel, Passagezellen und Transfektionszellen. Diese werden üblicherweise unter Verwendung von Gewebekulturmethoden durchgeführt, die auf aseptischen Techniken beruhen. Die aseptische Technik zielt darauf ab, eine Kontamination mit Bakterien, Hefen oder anderen Zelllinien zu vermeiden. Manipulationen werden normalerweise in einem Biosicherheitsschrank oder einem Laminar-Flow-Schrank durchgeführt, um kontaminierende Mikroorganismen auszuschließen. Antibiotika (zB Penicillin und Streptomycin) und Antimykotika (z. B. Amphotericin B und Antibiotika-Antimykotika-Lösung) können in gleicher Weise zu den Wachstumsmedien gegeben werden.

Während Zellen Stoffwechselprozesse durchlaufen, wird Säure produziert und der pH-Wert sinkt. Oft wird dem Medium ein pH-Indikator hinzugefügt, um den Nährstoffmangel zu messen.

Medienwechsel

Bei anhaftenden Pflanzen kann das Medium direkt durch Absaugen entfernt und dann ersetzt werden. Medienwechsel in nicht anhaftenden Kulturen umfassen das Zentrifugieren der Kultur und das Resuspendieren der Zellen in frischen Medien.

Bild 117A | IHC zeigt Epithelmarker auf A549 nach Kultivierung in 3D mit dem MLM | N3dbio / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:IHC_reveals_epithelial_markers_on_A549_after_culturing_in_3D_with_the_MLM.jpg) von Wikimedia Commons

Bild 117A | IHC zeigt Epithelmarker auf A549 nach Kultivierung in 3D mit dem MLM | N3dbio / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:IHC_reveals_epithelial_markers_on_A549_after_culturing_in_3D_with_the_MLM.jpg) von Wikimedia Commons

Autor : John Kaisermann

Referenzen:

Molekularbiologische Techniken I.

Werkzeuge der Molekularbiologie I.

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